Methoden & mehr: Proteinbiochemie
Produkt: ReadyTector® ist die all-in-one Detektionslösung für Western Blots. Sie ermöglicht eine schnelle Einschritt-Immundetektion ohne Hintergrund.... mehr
Artikel: Western Blots liefern wichtige Informationen zu Proteinen. Um aussagefähige Daten zu erhalten, sollte man aber einige Dinge beachten.... mehr
Ist Ihr Labor fit für die Zukunft? Prof. Angerer erklärt die Voraussetzungen und Potentiale in 15 Minuten. mehr
Produkt: Ja, es gibt ihn. Den analog zum Zielprotein visualisierbaren Proteinmarker. Ein Muss für den perfekten Western Blot!... mehr
Artikel: Fast kein Western Blot kommt ohne Milch oder BSA aus. Setzt man die beiden in der richtigen Reihenfolge ein, beeindruckt das Ergebnis nicht nur Journal-Editoren.... mehr
Trick: Eine Plexiglas-Ablage wird zur Schneidschablone für Western Blot-Filterpapiere.... mehr
So einfach, flexibel und skalierbar sind die modularen NEBNext UltraII Kits für Ihre Illumina NGS Library Prep mehr
Artikel: Der schottische Softdrink Irn Bru vertreibt nicht nur den Kater nach einer ausgiebigen Whiskey-Verkostung. Er ist auch für die Färbung von Western-Blots geeignet.... mehr
Produktübersicht: In den letzten Jahren wurden neue Western Blot-Verfahren entwickelt, wie zum Beispiel Kapillarelektrophorese-basierte Blots sowie... mehr
Trick: Schützen Sie Ihre Western Blots vor Licht aus Halogenlampen. Halogenlicht inaktiviert Antikörper. Resultat sind blanke Membranen.... mehr
Methode: Western Blots mit kurzen DNA-Fragmenten, die hundertmal günstiger sind als Antikörper.... mehr
Produktübersicht: Wie Southern- und Northern Blot kann man auch den Western Blot ganz ohne Strom und elektrisches Feld durchführen. Legt man einen Filterpapierstapel... mehr
Methode: Mit dem „Fast Semi-Dry WesternBlot“ lässt sich die Blotdauer bei Western Blots auf 12 min verkürzen. Wir zeigen, wie Sie damit auch noch Geld sparen.... mehr
Trick: Wenn Antikörper nach dem Western-Blot das Protein nicht mehr rausrücken, hilft Ihnen vielleicht dieser Stripping-Puffer... mehr
Trick: Banden auf einem Western-Blot kommen besser heraus, wenn man die Membran trocknet. Pusten, oder fönen, dann schnell fotografieren.... mehr
Trick: Nicht geklappt hat dieser Unblot-Versuch, obwohl er sich genau an das Rezept hielt.... mehr
Trick: Wieviel Gesamtprotein muss man auf ein SDS-Gel auftragen um im Western-Blot eine sichtbare Bande zu erhalten? ... mehr
Trick: Wer nicht für jeden Antikörper neu blotten will, der strippt“ seine Western Blots. Hier eine einfache Methode. ... mehr
Trick: Damit die Unblot-Methode funktioniert sollte kein SDS im Gel, die Glasplatten silanisiert sein und die Antikörperkonzentration hoch.... mehr
Trick: Beim Westernblot kann man mit Slim Fast überflüssige Banden blocken, das enthält jede Menge Sojaprotein und riecht auch noch schokoladig.... mehr
Artikel: Die meisten Protokolle für die Western Blot-Färbung mit Ponceau S schreiben eine 0,1-prozentige Lösung vor. Das ist hundert mal so viel als tatsächlich nötig.... mehr
Artikel: Wenn die Kaffeemaschine verkalkt ist, hilft meist ein bisschen Zitronen- oder Essigsäure. Das Säuren-Duo funktioniert aber auch als Fixierlösung für 2D-Gele.... mehr
Trick: Mithilfe einer Plastikbox für Wattestäbchen kann man einen sehr effektiven Gel-Gießstand herstellen, mit man bis zu 15 PAGE-Gele parallel gießen kann.... mehr
Trick: Gemeinsames Trennen hoch- und niedermolekularer Proteine im 7,5%igem Trenngel mit 20 minütigem Elektrophorese-Vorlauf. ... mehr
Methode: Ein cleverer Trick beschleunigt die Trennung von Isoproteinen mittels 2D-Gelelektrophorese und Westernblot – und verbessert die Qualität... mehr
Trick: Färbung der Banden im SDS-PAGE-Gel mit Direkt Rot oder Amido Schwarz ist schneller, als mit Coomassie. In 10 Minuten fertig.... mehr
Trick: Die Kolloidale Coomassie-Färbung ist ähnlich sensitiv wie eine Silberfärbung. Ohne Methanol. Nachweisgrenze bei 1-2 Nanogramm Protein/Bande.... mehr
Trick: Proteinbanden mit Coomassie, aber ohne Methanol, Ethanol und Essigsäure färben und entfärben. Eine gesundheitlich unbedenkliche Methode.... mehr
Trick: Hier ist es, nebst einer kleinen Fachdiskussion über den Zugang zu alten Originalveröffentlichungen: das original Laemmli-Rezept... mehr
Trick: Hier fragte ein Leser nach der original Laemmli-Rezeptur. In Artikel 104 wurde dem Leser dann geholfen.... mehr
Methode: Epicoccum nigrum produziert eine Substanz, mit der sich SDS-Gele und Blots färben lassen.... mehr
Methode: Einige Alternativen zur klassischen Silberfärbung von Gelen werden vorgestellt, die sogar Massenspektrometrie- und Edman-Sequenzierungs-verträglich sind.... mehr
Trick: Mischen von Proben mit Ladepuffer: Billiger ist als Parafilm, handlicher als eine Multi-Platte und dabei auch noch wiederverwendbar - die Wägeschale... mehr
Trick: 100%iger Alkohol eliminiert Luftbläschen aus Polyamid-Gelen, Nach dem Polymerisieren kann man den Alkohol einfach abgießen... mehr
Trick: Das Gel wird in der Coomassie-Lösing in der Mikrowelle erhitzt. Anschließend wird es ebenfalls in dier Mikrowelle entfärbt. Zeitersparnis. ... mehr
Trick: Luftgetrocknete Polyacrylamidgele können Sie wieder rehydrieren und so weiterbehandeln als wären sie neu. Viele Tipps zu getrockneten Gelen.... mehr
Methode: Eine hartnäckige IEF-Legende wird widerlegt: Die Denaturierung der Proben mit 8M Harnstoff führt nicht zu Deamidierung oder Carbamylierung. ... mehr
Methode: Raffinierte Kniffe, mit denen die 2D-Elektrophorese noch mehr Kleckse liefert – auch von seltenen Proteinen und bei ungünstigen Bedingungen. ... mehr
Trick: Ein gelöchertes Stück Plexiglas mit Stiel hält die Polyacrylamid-Gele in der Färbe/Entfärbewanne fest und verhindert so das zerfleddern der Gele.... mehr
Trick: Mineralöl auf den Gelstreifen schützt vor Austrocknen Auskristallisieren von Harnstoff, stört aber die Beladung der Polypeptide mit Dodecylsulfat.... mehr
Methode: IEF mit immobilisierten Ampholyten sind ein Wendepunkt" in der Proteom-Analyse... mehr
Methode: die Perfektionierung der isoelektrischen Fokussierung (IEF) in klassischen Freiflußelektrophorese-Geräten... mehr
Trick: Ein Stück Weichschaumstoff in der Entfärbewanne beschleunigt die Befreiung des Gels vom Coomassie-Farbstoff... mehr
Trick: Ein gefaltetes Papierhandtuch in der Entfärbewanne beschleunigt die Befreiung des Gels vom Coomassie-Farbstoff... mehr
Trick: Proteinbanden mit Coomassie, aber ohne Methanol. Färben mit Isopropanol und Essigsäure. Zum Entfärben nur 10% Essigsäure.... mehr
Trick: Wird ein Coomassie-gefärbtes, SDS-Gel geblottet, wird der ungebundene Farbstoff eluiert, gefärbte Proteine bleiben im Gel.... mehr
Trick: Lufttrocknen Sie Ihr Acrylamid-Gel zwischen Zellophanfopien. Sparen Sie sich Vakuum-Pumpe, Kühlfalle und Trocken-Apparatur.... mehr
Trick: Für die zweite Dimension der 2D-Gelelektrophorese kann man beim Anodenpuffer das Glycin weglassen – ohne Qualitätsverluste.... mehr
Trick: Sie können den Durchsatz bei der 2D-Gelelektrophorese mit Notched Inner Plates verdoppeln. Das können Sie auch selber bauen.... mehr
Trick: Entfärbt man ein Coomassie-Gel mittels Westernblot, besteht die Gefahr dass dabei Banden verschwinden. Hier die Methodik des Blottens.... mehr
Trick: Durch Schläuche fließt Wasser in mehreren Wendeln durch einen eisgefüllten Styroporblock. Kühlflüssigkeit für die 2D-Gelelektrophorese.... mehr
Methode: Bei der Auftrennung integraler Membranproteine in 2D-Gelen gehen mit dem Solubilisierungsmittel OBAS wesentlich mehr Proteine in Lösung.... mehr
Trick: Gel-Taschen reißen nicht so schnell, wenn Sie den Gel-Kamm nach dem Putzen mit Silikonpaste einreiben. Dann gleitet er leicht aus dem Gel.... mehr
Trick: Das Gel wird in der Coomassie-Lösing in der Mikrowelle erhitzt. Anschließend wird es ebenfalls in dier Mikrowelle entfärbt. Zeitersparnis. ... mehr
Produktübersicht: Die meisten Labore verwenden für die Affinitätsreinigung von Proteinen das Ni2+-His-Tag-System. Neue Affinitäts-Systeme wie zum Beispiel... mehr
Produktübersicht: Für die schnelle Extraktion von Proteinen aus Zelllysaten bieten Hersteller verschiedene Kits an. Die meisten nutzen Detergenzien für die Proteinextraktion.... mehr
Trick: Die Löslichkeit des Protein-Pellets bei der GTPC-Methode wird durch den Einsatz eines Methanol-Chloroform-Wasser-Gemisches stark verbessert.... mehr
Trick: Bei der FASP filtriert man Proteine. Auf der Ultrafiltrationsmembran werden sie dann zu Peptiden verdaut, die die Membran passieren können.... mehr
Trick: Einfach Plastikteile, wie Spacer nachzukaufen ist teuer. Hier gibt’s einen ebenso einfachen, wie bewährten Trick sich die kleinen Teile selber zu gießen... mehr
Trick: Geld und Materialsparen durch Portionierung und Teilung von großen Gelen und die Verwendung von Minigelen. Sparsamkeit im Labor.... mehr
Trick: Neue Oligoglycerol-Detergenzien erleichtern die Isolation von Membranproteinen, wie zum Beispiel G-Protein-gekoppelte Rezeptoren.... mehr
Trick: Proteine unterschiedlicher Größe können im Stufengel sauber getrennt werde. Das ist einfacher und billiger als ein Gradientengel.... mehr
Methode: Die verbesserte Auftrennung minimiert Proteinverluste und erhält die Struktur der Proteine. ... mehr
Trick: Bei der TAP kann Fractogel EMD eine Alternative zu Sepharose-IgG-Beads sein. Es ist billiger und funktioniert bei manchen Proteinen besser.... mehr
Methode: Neue Methoden zur Trennung von Membranproteinen von löslichen Proteinen.... mehr
Methode: Zur Isolierung von Plasmamembranen stellen Sie ein Zweiphasensystem aus Dextran und PEG her.... mehr
Trick: Mit Ausschneiden, Dialyse und Elektroelution lassen sich Proteine aus PAGE-Banden extrahieren und anschließend weiterverwenden.... mehr
Methode: Mit üblichen Petidsynthesizern kann man Peptide mit etwa 50 Aminosäuren Länge herstellen. Ein neues Flow-basiertes Peptidsynthese-System... mehr
Artikel: Eigentlich wollte Christian Münchs Gruppe eine Proteomik-Technik verbessern, nun könnte die neue mePROD-Methode sogar SARS-2-Wirkstoffe ausfindig machen.... mehr
Artikel: Mit optogenetisch gesteuerten Intrabodies lassen sich Proteine in der Zelle präzise an einen gewünschten Ort verschieben.... mehr
Artikel: Chemische Proteinsynthese-Inhibitoren sind alles andere als spezifisch. Viel genauer und reversibel arbeitet ein genetisch codierter Inhibitor.... mehr
Artikel: Ein universeller Epitop-tag, der für sämtliche Anwendungen gleich gut geeignet ist, wäre ein echter Knüller. Und es gibt ihn tatsächlich.... mehr
Methode: Mit der Trim-Away-Methode kann man ausgesuchte Proteine markieren und ihren schnellen Abbau durch das Proteasom einleiten.... mehr
Methode: Die zellfreie Proteinsynthese kann man ohne Klonierungen und Transformationen durchführen.... mehr
Artikel: Für ein optimiertes Verfahren zur zellfreien Proteinsynthese schmeißt man alle Zutaten in einen Pott. Das geht einfach und ist günstig.... mehr
Artikel: Mit der Kombination von GFP-Antikörpern und Degron-Systemen für die Proteolyse lassen sich gezielt Proteine in Zebrafischen deaktivieren.... mehr
Artikel: Split-Inteine sind ziemlich ungewöhnliche Proteine. Biologen können sie aber für das Labeln von Proteinen einsetzen.... mehr
Artikel: Mit einem künstlichen Vesikelsystem schaffen es Bakterien, auch voluminöse, hydrophobe Molekül-Brocken aus ihrem Inneren herauszuschleusen.... mehr
Trick: Das Bewegen von winzigen Proteinkristallen wird durch SSAW mittels stehenden akustischen Wellen präzise, kristallschonend und sicher.... mehr
Trick: Bei eine TBS-Stammlösung mit diesem Rezept hergestelt, muss man anschließend nicht mehr den pH einstellen. Der ist dann schon 7,5.... mehr
Methode: Proteine adsorbieren unterschiedlich stark an Oberflächen, was zu unerwünschten und unkalkulierbaren Probenverlusten führt.... mehr
Methode: Partikel-basierte Peptidsynthese anschaulich erklärt.... mehr
Methode: Wenn Proteine denaturiert sind, kann ein Wiederbelebungsversuch mit der Renaturierungshilfe b-Cyclodextrin helfen.... mehr
Methode: Membranproteine sind wählerisch wenn es darum geht, sie in Lösung zu bringen... mehr
Methode: Das zentrale Problem beim Mikrosequenzieren sind blockierte N-terminale Enden... mehr
Methode: Kleine Tricks für altbewährte Labormethoden (SDS-Gelelektrophorese, ELISA, FISH).... mehr
Methode: Wie bekommt man in der Proteomforschung wirklich alle Proteine in Lösung? Vermeintlich „ideale Solubilisierungsbedingungen“ werden geprüft und bewertet.... mehr
Artikel: Ein britisches Team entwickelte eine Wirkstoff-Screening-Strategie, bei der Membranproteine in kleinen Fettkugeln rekonstituiert werden, die wie winzige Raffaello-Pralinen aufgebaut sind.... mehr
Artikel: Die Coomassie-Färbung von Protein-Banden ist zeitaufwendig und das verwendete Methanol giftig. Schneller und gesundheitsschonender geht es mit der elektrophoretischen Variante.... mehr
Artikel: Fluoreszenz-Proteine bleichen unter dem Mikroskop ziemlich schnell aus. Bündelt man sie zu einem Array-Tag, halten sie wesentlich länger durch. ... mehr
Artikel: Für die Aufreinigung werden Proteine meist mit kurzen Peptid-Tags versehen. Mit einem zusätzlichen SNAC-Tag kann man sie problemlos wieder entfernen.... mehr
Methode: Fluoreszenzfarbstoffe werden häufig mit Antikörpern konjugiert, um sie für Durchflusszytometrie oder Mikroskopie einsetzen zu können... mehr
Methode: Die mikroNMR nutzt kleine Magnete und Mikrochips für die Steuerelektronik, um mit Nanomaterialien markierte Proteine oder andere Moleküle... mehr
Whitepaper: DigestPro – Vollautomat für die Proteomik – Proteinverdau, Probenaufreinigung und MALDI-Spotting... mehr
Methode: Mit der SP3-Technik ist eine standardisierte und effektive Probenvorbereitung für die massenspektrometrie-basierte Proteomik möglich... mehr
Artikel: Ein neuer Assay zur Protein-Quantifizierung ist nicht nur für den Hochdurchsatz geeignet – er ermöglicht auch die Normalisierung der Protein-Konzentration.... mehr
Artikel: Ein neuer Assay zur Protein-Quantifizierung ist nicht nur für den Hochdurchsatz geeignet – er ermöglicht auch die Normalisierung der Protein-Konzentration.... mehr
Methode: Die Analyse-Ergebnisse der Massenspektrometrie-basierten Proteomik hängen sehr stark von der richtigen Probenvorbereitung ab.... mehr
Methode: Mit der Ultra-swollen lipidic mesophas-Kristallisation gelingt auch die Kristallisation von Membranproteinen mit erhöhten Anteilen hydrophiler Domänen.... mehr
Trick: Dieser modifizierte Bradford-Assay ist deutlich empfindlicher als kommerzielle Kits. Entscheidend ist die Einstellung des pH-Wertes... mehr
Methode: Für Biologen ist die Raman-Spektroskopie interessant, weil sie schnell und nicht-invasiv ist.... mehr
Trick: Einfacher und Zuverlässiger Test der Succinat-Dehydrogenase-Aktivität, dem membranständigen Bindeglied zwischen Zitratzyklus und Atmungskette.... mehr
Trick: Gel Shift Oligos preiswert labeln mit einem dritten Oligo. An ein überhängendes 3´Ende wird ein gelabeltes universelles Oligo gehängt. Gut und billig.... mehr
Trick: Mit dem infrarot fluoreszierenden Reporter-Protein kann man das Molekulargewicht des IFP-Fusionsproteins im denaturierenden Proteingel ermitteln.... mehr
Methode: Wie kann man zellwandabbauende Enzyme bei der Arbeit beobachten.... mehr
Methode: Righettis Methode der Hexapeptid-Egalisierung gründet auf der Idee, dass jedes Protein an irgendetwas bindet.... mehr
Methode: Neue Erkenntnisse zum Lowry-Test und zur Plasmid-Präparation. ... mehr
Trick: Molekulargewichtsbestimmung von Membrabprotein-Komplexen durch Analytische Ultrazentrifugation. Die Glycosylierung der Proteine... mehr
Methode: Mit diesen Tests lassen sowohl die freien SH-Gruppen als auch die Gesamtzahl der Cysteinreste eine Proteins bestimmen... mehr
Trick: Eine Software hat Turbulenzen in einem 2D-Gel entdeckt, die sonst keiner sieht. Ansonsten soll „Proteomweaver“ aber ganz ordentlich arbeiten.... mehr
Trick: Ein selbstgemachtes ECL-Detektionsreagenz ist billiger und zeigt auch noch weniger unspezifische Banden als ein gekauftes.... mehr
Trick: Welches Molekulargewicht hatte eigentlich das bisher größte Protein, welches in einem Fremdorganismus exprimiert wurde?... mehr
Trick: 1. Faustregel zur Berechnung Rauminhalte eines Proteins und 2. Kostenlose Software zum Finden von Protease-Schnittstelen.... mehr
Trick: Peptidkonzentration messen: BCA-Assay, Bradford, Silberfärbung und Extinktionsmessung bei 214 nm können Alternativen zu 280 nm sein.... mehr
Trick: Vergleichbarkeit von silbergefärbten Banden bei der zweidimensionalen Elektrophorese: zwei äquilibrierte Streifengele mitlaufen lassen.... mehr
Trick: Mittels einer Eichreihe mit BSA und Amidoschwarz können Sie mit 1 Mikroliter Proteinextrakt eine Grobbestimmung der Konzentration bekommen.... mehr
Artikel: Eine neue Methode misst die Masse kleiner Biomoleküle anhand der Lichtstreuung. Damit kann man sowohl Proteine detektieren als auch die Interaktion von Wirkstoffen mit Proteinen analysieren.... mehr
Artikel: Kristallviolett wird meist für die Gramfärbung von Bakterien eingesetzt, ist aber auch eine Alternative zur Coomassie-Färbung von Proteinen in SDS-PAGE-Gelen.... mehr
Methode: Moderne Proteinlabelling-Methoden basieren zumeist auf bioorthogonalen Klick-Chemie-Reaktionen sowie der Erweiterung des genetischen Codes... mehr
Methode: Proteinsynthese und gleichzeitige Fixierung direkt auf dem Microarray. So kann man durch Zugabe zu testender Interaktionspartner etwas über mögliche... mehr
Methode: Inteine schneiden sich selbst aus Vorläufer-Proteinen heraus. Forscher nutzen dies zur Proteinreinigung und Analyse von Protein-Protein-Interaktionen.... mehr
Methode: FRET-Systeme dienen als molekulare Lineale, um Entfernungen zwischen Biomolekülen zu messen. Erfahren Sie, wie's funktioniert.... mehr
Methode: Mit Fluoreszenzfarbstoffen kann man Entfernungen zwischen Biomolekülen messen und molekulare Wechselwirkungen in Echtzeit verfolgen.... mehr
Methode: Die geschilderte Caged-cAMP-Methode macht intrazelluläre Signalwege in vivo sichtbar. Mit Licht-Impulsen wird dabei die Membranleitfähigkeit gemessen.... mehr
Artikel: Wenn das Lieblings-Protein partout nicht kristallisieren will, könnte ihm ein starker Magnet auf die Sprünge helfen.... mehr
Methode: Das EF-X-Verfahren macht Konformationsänderungen und Bewegungen innerhalb von Proteinen sichtbar... mehr
Artikel: Neu erarbeitete Kriterien für die Einzelmolekül-FRET ermöglichen präzise und miteinander vergleichbare Abstandsmessungen. Beste Voraussetzungen für eine verlässliche Strukturanalyse.... mehr